01冷冻免疫细胞复苏后活力依旧

2021年《中国免疫学杂志》发表了一篇关于《冷冻保存对NK细胞活率及其肿瘤杀伤效果的影响》[1]的研究文章。

▲参考文献1

该研究经过对比研究表明，冷冻保存的NK细胞满足临床应用所要求的活率和高效杀伤肿瘤细胞能力，可以发展成为即用型细胞药物，具有广泛的临床应用前景。

研究发现，即使冷冻三个月，NK细胞复苏后的活力仍可达到92%左右，即使复苏24小时后，活力仍可达到80%。这意味着，它们仍具备良好的战斗能力。

▲参考文献1：冻存前后NK细胞活力对比

对于新鲜和冷冻的NK细胞的肿瘤杀伤效果，实验结果同样让人欣喜。

NK细胞能够分泌一种叫做IFN-γ的物质，有助于击败肿瘤。冷冻后，这一能力虽然有所下降，但差异并不显著。无论是在不同的靶点对比下，还是在不同的冷冻时间内，它们对癌细胞的杀伤效果几乎没有差异。

▲ 参考文献1：新鲜及冻存NK细胞IFN-γ的分泌量

▲参考文献1：新鲜NK细胞与冻存NK细胞表面活化性受体表达情况

▲参考文献1：新鲜NK细胞与冻存NK细胞表面活化性受体表达情况

▲参考文献1：96小时NK细胞对人肺癌细胞A549的杀肿瘤效果

不论是新鲜的还是“冷藏”后的，NK细胞都是我们身体的勇敢战士。以上研究证明，即使经过冷冻保存，它们的战斗力也几乎没有减弱。

02冻存的免疫细胞新鲜免疫细胞效果相同

2022年，一篇发表《Front Oncol》杂志上的文献[2]通过对比了从成人外周血分离的新鲜免疫细胞和分离后冻存过的免疫细胞在制备CAR-T后细胞的活性及临床应用后患者的临床治疗情况。

研究数据证明，冷冻保存的免疫细胞仍显示出很高的抗肿瘤效力和特异性，且能扩增足够的细胞数量用于临床治疗肿瘤并使患者完全缓解，并且对比新鲜免疫细胞，效果没有统计学差异。这再次印证了冻存后的免疫细胞可用于今后细胞临床治疗的可行性。

外周血单个核细胞（PBMC）是包含多种免疫细胞的混合物，这些细胞是先天性免疫和适应性免疫系统的关键组成部分，可以保护身体免受病毒、细菌及寄生虫的感染和异物侵扰，并且能够对抗肿瘤细胞。

研究结果显示，在CAR-T细胞的生产过程中，冷冻保存对外周血单个核细胞（PBMC）的亚群组成没有影响。

在培养过程中，CAR-T细胞在第6-8天被冷冻保存，平均保存29天。大部分患者的CAR-T细胞在解冻后能继续增殖。解冻后，细胞先扩增7倍，再在2至3天内扩增2.1倍，总数达到618±525*10^6。所有患者的CAR-T细胞剂量都达到了1*10^6 CART/kg的目标。因此，冷冻保存的CAR-T细胞在解冻增殖后可以生成足够的细胞数量用于患者的治疗。

冷冻保存的CAR-T细胞显示出仍然高的抗肿瘤效力和特异性。具体到临床数据上，在118名接受临床治疗的患者中，有115名获得了临床缓解，73%实现了客观缓解，并且冷冻后的免疫细胞与新鲜免疫细胞具有相同的作用效果。

此外，冷冻细胞技术也为CAR-T细胞的制备提供了相当大的灵活性，这在干预高度晚期癌症患者时经常需要。7名患者在CAR-T制备过程中临床恶化，决定先冷冻储存，在稍后的时间点复苏使用，最后有4名患者达到了完全缓解状态。

03细胞储存

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